应用Design-Expert.V8.0.6软件对试验结果进行分析,面法得到白芷挥发油得率与各因素之间交互作用的优化油提艺及氧化研究三维效应曲面图,如图5~图10。白芷由图可知,挥发活性白芷挥发油得率随着液料比、取工其抗浸泡时间、面法提取时间和粉碎粒度的优化油提艺及氧化研究增加,呈现先增加后减小的白芷变化趋势,各因素间的挥发活性交互作用明显,与方差分析的取工其抗结果一致。
通过建立的面法数学模型分析,可预测得到白芷挥发油的优化油提艺及氧化研究最佳提取工艺条件为液料比为19.67∶1mL/g、浸泡时间为2.28h、白芷提取时间为5.36h、挥发活性粉碎粒度为66.14目,取工其抗在此条件下的挥发油得率为2.274%。考虑到操作的可行性和白芷挥发油提取的实际条件,对预测工艺条件进行修正。确定最终的白芷挥发油最优提取工艺条件为:液料比为20∶1mL/g、浸泡时间为2.3h、提取时间为5.4h、粉碎粒度为65目,此时的白芷挥发油得率为2.273%,与预测值接近,说明建立的模型真实可靠,可以比较准确地描述白芷挥发油提取工艺中液料比A(mL/g)、浸泡时间B(h)、提取时间C(h)、粉碎粒度C(目)4个因素与挥发油得率Y之间的关系。
如图11所示,当白芷挥发油浓度从0.2mg/mL增加到1.2mg/mL,对DPPH自由基的清除率从16.81%增加到82.12%,其IC50为0.722mg/mL,随着挥发油浓度的增加,其对DPPH自由基的清除率也随之增加,表明白芷挥发油对DPPH自由基有一定的清除作用,其抗氧化作用弱于VC。
如图12所示,当白芷挥发油浓度从0.2mg/mL增加到1.2mg/mL,对羟自由基的清除率从12.41%增加到68.12%,其IC50为0.882mg/mL,表明白芷挥发油对羟自由基有一定的清除作用,其抗氧化作用弱于VC。
基于白芷挥发油的药用价值,以白芷为原料,通过单因素试验和Box-Behnken响应面法优化水蒸气蒸馏法提取白芷挥发油的提取工艺,最佳提取条件为:液料比为20∶1mL/g、浸泡时间为2.3h、提取时间为5.4h、粉碎粒度为65目,此时的白芷挥发油得率为2.273%,说明采用Box-Behnken响应面法优化白芷挥发油的提取方法可行、可靠。并对在此条件下提取得到的白芷挥发油测定了对DPPH自由基和羟基自由的清除效果,考察其抗氧化活性。结果表明:白芷挥发油具有较强的抗氧化性,且随着挥发油浓度的增大,其抗氧化活性增强,并呈线性关系。本研究通过优化白芷挥发油的提取工艺,为白芷挥发油产品的进一步开发提供了一定的理论基础,白芷挥发油的抗氧化活性研究,对于开发天然来源的美白化妆品、食品抗氧化剂和保鲜剂有一定的现实意义和参考价值。
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